細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

MET-5A細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持MET-5A細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 MET-5A細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于MET-5A 細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

M199 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                      430 ml

特級胎牛血清                                             50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒

Human Legionella aibody IgA (LP Ab-IgA) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒

Porcinecholecystokinin,CCKELISAKit 豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒分裝

CLIAKitforALPELISAKit大鼠堿性0酸酶

血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒

大鼠鈣粘蛋白EGF大鼠LAG七經(jīng)G-型受體2(CELSR2)試劑盒 ，英文名： CELSR2 ELISA Kit

Rat alpha glucosidase (alpha -glucosidase) ELISA Kit 大鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒

RatErythropoietieceptor,EPORELISAKit 大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)試劑盒分裝

CLIAKitforEELISAKit大鼠雌激素

細胞培養(yǎng)懸液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學發(fā)光法定量試劑盒50次

Rathydroxyproline,HypELISAKit大鼠羥脯(Hyp)試劑盒

中文名稱   方法   規(guī)格

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISAKit   ELISA. 

小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISAKit   ELISA. 

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISAKit   ELISA.

G蛋白偶聯(lián)受體110抗體

CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體

PDGFC重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白  Protein

肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白 Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)

SLITRK6重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標簽) Protein

ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)

TEK Protein Rat 重組大鼠 Tie2 / TEK 蛋白

MET-5A 細胞專用培養(yǎng)基RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)重組蛋白 Recombinant RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)

ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)

ST6GAL1重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標簽) Protein

PDGFB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白

CRELD1重組人 CRELD1 蛋白 (His 標簽) Protein