大鼠原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細胞的培養(yǎng)。

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。

KT3 tag KT3 tag標簽抗原 0.5mgKT3 tag KT3 tag標簽抗原

IL1R1 Protein Human 重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白

CD59重組食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein

IgG2a Protein Mouse 重組小鼠 IgG2a-Fc 蛋白

CPLX2重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 Protein

大鼠成纖維細胞生長因子11(FGF11)試劑盒 ，英文名： FGF11 ELISA Kit

Human XC chemokine receptor 1 (XCR1) ELISA Kit 人XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒

RatCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCr(MouseCrosslaps)ELISAKit小鼠骨膠原交聯(lián)

細胞血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)定量試劑盒20次

RatCystatinC,Cys-CELISAKit大鼠半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T

乳酸（LD）（血清、組織）檢測   Lactic acid (LD) (whole blood) detection

乳酸（LD）（全血）檢測   Lactate dehydrogenase (LDH) detection

乳酸脫氫酶（LDH）檢測   ATP enzyme (sodium and potassium, calcium and  ATP enzyme) detection

ATP酶（、鈣ATP酶）檢測   Any one, sodium potassium calcium and  ATP enzyme detection

豚鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒 ，英文名： M-CSF ELISA Kit

Human apoptosis protease activating factor 1 (ICAD) ELISA Kit 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)試劑盒

Monkeymonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBFP(Humanbasicfetoprotein,BFP)ELISAKit人堿性胎兒蛋白

細菌氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒規(guī)格：96T/48T

MS4A12蛋白抗體

核仁蛋白10抗體

大鼠原代腸（結(jié)腸）間質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基CD59重組食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein

KT3 tag KT3 tag標簽抗原 0.5mgKT3 tag KT3 tag標簽抗原

CPLX2重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 Protein

IL1R1 Protein Human 重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白

IgG2a Protein Mouse 重組小鼠 IgG2a-Fc 蛋白